發(fā)酵罐滅菌之后，就可以用來培養(yǎng)細菌了。

1.發(fā)酵罐接上pH電極的插頭, 接通底部冷卻水管和空氣出口處的冷凝器上的冷卻水管, 將各硅酮管置于相應(yīng)的蠕動泵上。

2.把攪拌馬達置于攪抖聯(lián)動裝置上。

3.把光標調(diào)到“Temperature”檔,設(shè)定一個合適的溫度。

4.校正溶氧電極的滿刻度。

1)利用光標將攪拌速度調(diào)至 大轉(zhuǎn)速，一般為800 r/min,把通氣量調(diào)節(jié)到1.0 L Air/L medium/min(1VVM)。

2)調(diào)到calibration界面，光標調(diào)至溶氧處，“span”檔,設(shè)定讀數(shù)為100，反復(fù)調(diào)節(jié)幾次，直至穩(wěn)定至100，轉(zhuǎn)至menu界面。

5.其他參數(shù)設(shè)定。把光標調(diào)到Agit檔，設(shè)定 小值為200 r/min。把光標調(diào)到DO檔,設(shè)定參數(shù)為合適的值, 調(diào)整為與溶氧偶聯(lián)檢測。把光標調(diào)到Agit檔，設(shè)定 大值為800 r/min;把光標調(diào)到pH檔,設(shè)定參數(shù)為7.0，調(diào)整為自動檢測;接上酸(堿)瓶，并打開自動檢測系統(tǒng)。

6.接種：發(fā)酵罐的接種就是將蘸滿乙醇的棉花球纏在接種口外套上, 點燃火焰以前將接種口的蓋子旋松。然后點燃發(fā)酵罐上的棉花球, 取掉蓋子, 立即在火焰中加入各組分培養(yǎng)基和種子液。 后將蓋子浸泡在乙醇中, 接種后, 用攝子將蓋子準確放回原位, 旋緊。

7.打開記錄實驗過程的專用軟件。

8.發(fā)酵過程中，每隔兩小時記錄溶氧、轉(zhuǎn)速、測定OD600，取樣品5 mL儲存進行各種分析檢測。

認真的對照上面的步奏進行，發(fā)酵缸的操作就順利完成了。